PCR管选品指南

模板DNA的变性：

模板DNA经加热至94℃左右一定时间后，使模板DNA双链或经PCR扩增形成的双链DNA解离，以便它与引物结合，为下轮反应做准备。

模板DNA与引物的退火(复性)：

模板DNA经加热变性成单链后，温度降至55℃左右后,引物与模板DNA单链的互补序列配对结合。

引物的延伸：

DNA模板——引物结合物在Taq的作用下，以dNTP为反应原料,按碱基配对与半保留复制原理，合成一条新的与模板DNA 链互补的半保留复制链。

该技术是在模板DNA、引物和四种脱氧核糖核苷酸存在下，依赖于DNA聚合酶的酶促合成反应。

DNA聚合酶以单链DNA为模板，借助一小段双链DNA来启动合成，通过一个或两个人工合成的寡核苷酸引物与单链DNA模板中的一段互补序列结合，形成部分双链。

在适宜的温度和环境下，DNA聚合酶将脱氧单核苷酸加到引物3´-OH末端，并以此为起始点，沿模板5´→3´方向延伸，合成一条新的DNA互补链。

1、材质：PCR 耗材一般都是 PP 材质，因为 PCR/qPCR 耗材通常会与试剂或样品直接接触，表面不易于粘附生物分子，有良好的化学耐性及温度耐受性。

2、PCR 管/板体积：依据具体的实验要求选用合适的产品。单管和联管是两种最常用的形式。

3、管盖选择：单管和连管都有平盖和凸盖之分，而平盖和凸盖各有优点。平盖适用于荧光定量PCR。

4、管壁厚度：管壁厚度会直接影响热传导率，极薄的壁厚可优化热传递减少循环时间。进一步减少了热障，从而带来更快，更稳健的反应。

5、颜色：PCR板通常可提供多种不同的颜色形式，透明的 PCR 管更有助于进行样品分类管理。白色 PCR 产品可最大程度地反射荧光信号，减少孔间信号交叉污染，可优化实时荧光定量 PCR 的结果。不同品牌仪器，由于荧光检测器位置设计不同，请参考生产厂家推荐的耗材。